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產(chǎn)品簡介
T7 ARCA加帽 mRNA合成試劑盒It produces capped RNA by in vitro transcription using T7 RNA polymerase and the anti-reverse cap analog (ARCA) m2 7,3'-OG[5']ppp[5'].
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產(chǎn)品名稱：T7 ARCA-Capped Message Transcription Kit(T7 ARCA加帽 mRNA合成試劑盒)
介紹：
MessageMAX™ T7 ARCA-Capped Message Transcription Kit 使用 T7 RNA 聚合酶和抗反向帽類似物 (ARCA) m2 7,3'-OG[5']ppp[5'] 通過體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生加帽 RNA。 30 分鐘，20 μl MessageMAX 反應(yīng)從 1 μg 1.4 kb 標準 T7 對照模板 DNA 中產(chǎn)生多達 60 μg ARCA 加帽的 RNA。 由于 ARCA 在 m7 G 核苷酸上包含一個 3'-O-甲基（圖 1），因此在體外轉(zhuǎn)錄/封端反應(yīng)期間，ARCA 只能以正確的方向摻入 RNA 的 5' 端。 這不適用于標準電容模擬 (m7 G[5']ppp[5']G)。 因此，ARCA 摻入導(dǎo)致在體內(nèi)比標準帽類似物更有效地翻譯的加帽 RNA 的合成。 ARCA/NTP PreMix 包含所有四種核糖核苷酸和 ARCA。 PreMix 可確保每種 NTP 的最佳濃度以及 ARCA 與 GTP 的比例 (4:1)，從而最大限度地提高轉(zhuǎn)錄本上限 (~80%) 和產(chǎn)量。 由于反應(yīng)中 GTP 的濃度有限，ARCA 優(yōu)先作為轉(zhuǎn)錄物的第一個或 5'-末端 G 并入。 CELLSCRIPT 還提供 INCOGNITO™ T7 ARCA 5mC- & -RNA 轉(zhuǎn)錄試劑盒，用于生產(chǎn)含 5-甲基胞嘧啶-假尿苷 (GA m5 C) ARCA 加帽的 RNA。 這種 RNA 已被 Warren 等人用于具有里程碑意義的出版物中。 成功地將多種人類細胞類型重編程為誘導(dǎo)性多能干細胞。研究表明，-mRNA 和 5mCmRNA 被翻譯成更高水平的蛋白質(zhì)，并在表達各種 RNA 的人類和其他哺乳動物細胞中誘導(dǎo)較低的先天免疫反應(yīng) 傳感器與相應(yīng)的未修飾 mRNA 相比。
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