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      當前位置:首頁技術文章BioLegend流式抗體選擇指南

      BioLegend流式抗體選擇指南

      更新時間:2025-07-29點擊次數:1543

       一、流式抗體核心選擇原則(快準狠?。?/span>  

       1. 按樣本物種選克隆號  

      物種

      推薦抗體來源

      明星克隆號舉例

      小鼠抗人

      CD3-UCHT1

      小鼠

      大鼠抗小鼠

      CD4-GK1.5

      大鼠

      小鼠抗大鼠

      CD45-OX1

      > ? 避坑:勿用人源化抗體做小鼠實驗(交叉反應假陽性)  

       2. 按靶標表達量選熒光染料  

      image.png

       3. 按激光器選染料組合  

      儀器配置

      推薦方案

      單激光(488nm

      FITC + PE + PerCP

      雙激光

      FITC + PE-Cy7 + APC

      四激光

      BV421 + PE + APC + Spark NIR780

       

       二、流式抗體3步速選流程圖(收藏!)  

      image.png 

       三、流式抗體高頻問題解決方案  

       1. 信號弱/無信號  

      - 對策:  

        1. 檢查抗體有效期(≤1年)  

        2. 增加抗體濃度(常規1:100 → 1:50)  

        3. 改用高亮度染料(如FITC→PE)  

       2. 背景噪音高  

      - 對策:  

        1. Fc阻斷劑(BioLegend 422301)  

        2. 優化破膜時間(胞內染≤30min)  

        3. 設置FMO對照  

        3. 多色串擾嚴重  

      - 對策:  

      沖突組合

      替代方案

      FITC vs PE

      改用PerCP

      APC vs PE-Cy7

      改用APC-Cy7

       

       

       四、萬能多色方案模板  

       4色基礎版(適合凋亡/周期分析)  

      通道

      靶標

      FITC

      Annexin V

      PE

      CD4

      PerCP

      CD8

      APC

      PI/7-AAD

      8色免疫分型版(適合T/B/NK分析)  

      通道

      靶標

      BV421

      CD3

      PE

      CD4

      APC

      CD8

      PE-Cy7

      CD19

      APC-Cy7

      CD56

      Spark NIR685

      CD16

      FITC

      CD45

      PerCP

      HLA-DR

       五、流式抗體品牌選購建議  


      需求

      推薦品牌

      明星產品線

      高性價比

      BioLegend

      PureBlk™ 阻斷劑

      超高靈敏度

      BD Biosciences

      Horizon™ 染料

      稀有靶標

      Thermo Fisher

      eBioscience™



      BioLegend、BD Biosciences、Thermo Fisher代理——天津益元利康生物科技有限公司,提供各種蛋白、細胞、菌株、抗體、試劑盒、耗材等,歡迎咨詢選購。

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