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      流式細胞術一文Get

      更新時間:2025-01-16點擊次數:1466

      一、流式細胞術

      流式細胞術(Flow CytometryFCM)從字面意義理解,Flow—FluidCyto—CellMetry—Measurement,是一種對液流中排成單列的細胞或其它生物微粒(如微球,細菌,小型模式生物等)逐個進行快速定量分析和分選的技術。其特點是通過快速測定庫爾特電阻、熒光、光散射和光吸收來定量測定細胞DNA含量、細胞體積、蛋白質含量、酶活性、細胞膜受體和表面抗原等許多重要參數。根據這些參數將不同性質的細胞分開,以獲得供生物學和醫學研究用的純細胞群體。

      1.流式細胞術的關鍵優勢:

      高通量:一次實驗能夠分析數千至數百萬個細胞,幾秒內完成大規模數據收集。

      單細胞多參數分析:一次實驗可同時測量單個細胞的多個參數,如細胞大小、顆粒性、表面標志物和內部復雜性。

      數據精確度高:通過熒光信號與細胞大小等物理參數結合,提供精確的亞群分析。

      2.核心應用

      免疫表型分析(Immunophenotyping:通過熒光標記的抗體鑒定不同的免疫細胞亞群。

      細胞周期分析:評估細胞群體的不同周期階段。

      細胞凋亡檢測:通過標記凋亡相關分子檢測細胞凋亡情況。

      細胞活力檢測:結合活細胞與死細胞染料,分析細胞活力狀態。

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      二、流式細胞術原理

      1. 特定波長的激光束直接照射到高壓驅動的液流內的細胞,產生的光信號被多個接收器所接收,包括激光束直線方向上接收到的散射光信號(前向角散射)和激光束垂直方向上接收到的光信號(散射光信號(側向角散射)和熒光信號)。液流中懸浮的直徑從0.2-150 μm的細胞或顆粒能夠使激光束發生散射,細胞上結合的熒光化合物被激光激發后能夠發射熒光。散射光信號和熒光信號被相應的接收器接收,根據接受到的信號的強弱從而反映每個細胞的物理學特征。

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      2. 熒光的原理 是流式細胞術中的核心。熒光分子(稱為熒光團,fluorophore)通過吸收外部光源(如激光)產生激發,隨后回到基態時發出熒光。這一發射光信號可被檢測,并用于標記不同的細胞組分,如細胞表面或內部抗原。

      3. 熒光過程的三個階段:

      激發(Excitation):熒光分子吸收激光能量,電子從基態躍遷到激發態。

      激發態壽命(Excited Lifetime):熒光分子處于激發態的時間極短,通常為納秒級。

      發射(Emission):電子回到基態時釋放多余的能量,以較低能量的光子形式發射,波長比激發光更長。

      4. 斯托克斯位移(Stokes Shift):

      斯托克斯位移是指激發光的波長與發射光波長之間的差異,發射光總是比激發光的波長長、能量低。這個位移是區分不同熒光染料發射信號的基礎。利用這種位移可以有效避免激發光與發射光的混淆。

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      5.熒光染料的選擇:

      熒光染料是根據它們的激發波長和發射波長來選擇的。常見的熒光染料如Alexa Fluor系列、FITCPE等,它們有不同的光譜特性,適用于不同的激光器配置。(Alexa Fluor 488 的激發波長為488 nm,發射波長為530 nm


      三、Biolegend抗體代理——天津益元利康生物科技有限公司,為您提供流式抗體等產品。歡迎咨詢!!!!!

      部分Biolegend產品列表:

      品牌貨號商品名稱
      Biolegend803002Purified anti-β- Amyloid, 1-16 Antibody (Previously Covance catalog# SIG-39320)
      Biolegend139335Brilliant Violet 510™ anti-mouse CD64 (FcyRI)  
      Biolegend107628APC/Cyanine7 anti-mousel-A/-E Antibody
      Biolegend151210PE anti-mouse/human Ki-67 Antibody
      Biolegend103205FITC anti-mouse/human CD45R/B220 Antibody
      Biolegend130021APC anti-mouse Tim-4
      Biolegend740150LEGENDplex™ Mouse Inflammation Panel (13-plex) with Filter Plate
      Biolegend801202Purified anti- Tubulin β 3 (TUBB3)
      Biolegend145513Brilliant Violet 605  anti-mouse CD185 (CXCR5)
      Biolegend109110PE/Cyanine7 anti-mouse CD279 (PD-1) Antibody
      Biolegend480172MojoSort™ Mouse CD146 (LSEC) Selection Kit
      Biolegend480017MojoSort  Buffer (5X)


      天津益元利康生物科技有限公司:

      一、輻射五大服務方向:

       1.國內試劑耗材經銷代理;

       2.國外試劑訂購(直訂,或境外代理);

       3.基因組測序(二代,二代+三代);

       4.基因分型(SNP檢測):低//中 高通量項目;

       5.生物樣本運輸(國內、);

      二、多家代理品牌,涉及30多種較有名品牌,經營代理500多個品牌:

      QiagenSigmaR&DEpigentekThermoFisherDNA GenotekUSA ScientificMatreyaSage ScienceList LabsMacrocyclicsSteraloidsNIBSCmobioimmunodxcellsystemsmedicagoabcamCSTRocheBethylsino Biologicalclodrosomeadi BIO-WORLDTOKU-EHYPHEN BioMedmoltoxZeptoMetrixInternational HumicbiocytexToxin Technology  StreckElastinbiomaxOrflo TechnologiesAccegenAdvbiomartgenlantisR&DCygnus Technologies LLCEnzyme ResearchBio/Data CorporationGreer Lab SolarbiobangslabsbiolinemusechemNovocastra stemrdhyphen-biomedpolyplusmoltox exiqonpentapharmverichemlabsGenStarALZETlucernatechnologies meridianorigenezimmerpeacocktechhorizondiscoveryReagentsmegazymeelisasystems………

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