Transwell細胞遷移實驗注意事項

Transwell細胞遷移實驗，也稱為Transwell遷移或侵襲測定實驗，是一種用于細胞生物學和分子生物學的實驗室技術，用于研究細胞通過多孔膜的運動。前面已經講過實驗步驟，那實驗過程中需要注意些什么呢？

注意事項一

 基質膠在室溫下容易凝固，鋪膠過程全程需要在冰上操作。

注意事項二

 基質膠濃度也是影響細胞遷移和侵襲的因素之一，所以基質膠的濃度和稀釋比例需根據供應商提供的信息和實驗具體情況調整，必要時可設置預實驗摸索最佳濃度和稀釋比例。一般常用濃度為1mg/mL。

注意事項三

  鋪膠時，盡量垂直小室底部在小室底部中間加入，可避免氣泡的產生。

注意事項四

  吸出小室內未結合的基質膠時需確保移液管的尖頭不會刮傷凝膠層表面。

注意事項五

 不同細胞的遷移和侵襲能力不同，可設置一系列細胞密度梯度摸索合適的細胞接種密度。

注意事項六

  小室的放置過程經常有氣泡產生，一旦產生氣泡，下層培養液的趨化作用就減弱甚至消失，因此需特別留心。一旦出現氣泡，需將小室提起或用槍頭去除，去除氣泡后重新放置。

注意事項七

  接種細胞1-2小時后，可對培養板進行檢查，確保沒有大氣泡產生。但有時會觀察到有極小的汽包產生，但并不影響細胞遷移和侵襲，也可輕輕敲擊孔板去除。

注意事項八 

  用PBS清洗小室時，需避物理觸碰小室底部。可以準備幾個無菌燒杯或培養皿，倒入適量PBS，依次涮洗，可提高效率。

注意事項九

  拍照前需適當晾干小室，水分會影響鏡下視野。

小tips：

實驗中會用到的PBS推薦

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