細胞轉(zhuǎn)染是如何分類的？

細胞轉(zhuǎn)染是指將外源性基因?qū)氲郊毎麅?nèi)的技術(shù)。那你知道細胞轉(zhuǎn)染是如何分類的嗎？讓我們一起來看看吧！

一、根據(jù)導入時間長短進行分類

根據(jù)導入的核酸存在于宿主細胞的時間長短，可以分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

瞬時轉(zhuǎn)染（transient transfection）：指將構(gòu)建好的質(zhì)粒通過某種方式導入到哺乳動物細胞內(nèi)，該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細胞自身的基因組上。細胞中瞬時轉(zhuǎn)染的外源基因表達時間有限，通常僅持續(xù)幾天，直到外源基因在細胞分裂過程中因各種因素丟失為止。多用于啟動子和其他調(diào)控元件的分析。目前，由于各種轉(zhuǎn)染試劑的發(fā)明，哺乳動物細胞的瞬時轉(zhuǎn)染已經(jīng)用于生產(chǎn)具有適當折疊和翻譯后修飾的重組蛋白。

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（Stable transfected）：外源DNA整合到細胞基因組中或作為附加體質(zhì)粒保留在細胞中。與瞬時轉(zhuǎn)染不同，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染能夠整合到宿主基因組，因此轉(zhuǎn)染細胞及其子代細胞的基因組中會同時保留轉(zhuǎn)染的DNA。由于穩(wěn)轉(zhuǎn)效率較低，因此選用有效地轉(zhuǎn)染策略和篩選方法很重要。

二、根據(jù)轉(zhuǎn)染方式進行分類

根據(jù)轉(zhuǎn)染方式可以分為化學，生物，物理方法。細胞由帶負電荷的磷脂雙分子層構(gòu)成，這對大分子物質(zhì)來說是個不可透過的屏障，比如DNA和RNA的磷酸骨架，其也帶負電荷。為了使核酸穿過細胞膜，研究人員開發(fā)了多種技術(shù)，大致分為三類：

化學方法：利用載體分子包被核酸使其呈現(xiàn)中性電荷或正電荷。如陽離子脂質(zhì)體方法、磷酸鈣共沉淀法、其他陽離子物質(zhì)介導等技術(shù)。

生物方法：利用基因工程病毒轉(zhuǎn)染非病毒基因到細胞中。現(xiàn)在比較多見的是各種病毒介導的轉(zhuǎn)染技術(shù)。

物理方法：在細胞膜表面產(chǎn)生一個瞬時的孔從而導入DNA。如電穿孔法、顯微注射法。

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