polyplus轉染試劑 jetPRIME®應用

更新時間：2023-06-28

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polyplus轉染試劑 jetPRIME®應用

polyplus轉染試劑 jetPRIME®是一種功能*、用途廣泛的DNA和siRNA轉染試劑，用于日常實驗，可產生高效可靠的科學結果。jetPRIME®確保在各種粘附細胞中具有高的DNA轉染效率和優異的基因沉默。jetPRIME®也是DNA/siRNA共轉染或幾種質粒共遞送的理想選擇。此外，jetPRIME®試劑對細胞非常溫和，因為它在轉染過程中需要少量的試劑和核酸。

polyplus轉染試劑 jetPRIME®應用方向多樣，主要的應用方向如下：

一、質粒轉染

jetPRIME®導致不同來源的轉染粘附細胞系以及原代細胞的百分比非常高，如下表：

細胞類型	細胞系	描述	轉染效率
上皮細胞	B16-F10	小鼠黑色素瘤	70-80%
	BNL-CI2	小鼠正常胚胎肝細胞	50-60%
	CaCO2	人結腸癌上皮	20%
	CHO-K1	中國倉鼠卵巢	70%
	HCT-116	人結腸癌	70%
	Hela	人宮頸上皮樣癌	70-90%
	Hepg2	人肝癌	50-70%
	Huh-7	人肝癌	30-50%
	MCF-7	人乳腺腺癌	50%
	MCF-10A	人乳腺腺癌	40-50%
	MDCK	犬腎上皮	20%
	PC-3	人類前列腺癌	70%
	Vero	非洲綠猴腎	50%
成纖維細胞	COS-7	非洲綠猴腎	60-80%
	HEK-293	人胚腎成纖維細胞	80-90%
	MRC-5	人胚肺成纖維細胞	50%
	NIH-373	小鼠胚胎成纖維細胞	50-70%
成髓細胞	Raw 264.7	小鼠單核巨噬細胞	40-50%
成肌細胞	C2C12	鼠成肌細胞	70-90%
神經元	SH-SY5Y	人類神經母細胞瘤	70-80%
原發性肝細胞		人原代肝細胞	20-30%
原發性黑色素細胞		人原代黑素細胞	40-50%

表1：使用jetPRIME®的各種細胞類型的轉染效率。轉染后24小時通過FACS分析測定GFP陽性細胞的百分比。

質粒是常見于細菌中的環狀DNA小分子。質粒與染色體DNA分開存在和復制，在細菌中，質粒通常攜帶有利于細菌生存的基因。質粒可以被有意地引入所需的細胞中，并用于在特定細胞系中過表達感興趣的基因。這一過程被稱為DNA轉染，是研究感興趣的基因功能或蛋白質的常用方法。

二、基因編輯

CRISPR/Cas9系統在哺乳動物細胞中的使用最近已經成為在特定基因座修飾細胞基因組的一種非常方便的方法。它涉及將（a）編碼Cas9的一個或多個質粒、特異性gRNA和最終要插入的序列，或（b）一個或兩個質粒和RNA分子（gRNA）的混合物瞬時轉染到哺乳動物細胞中。

三、siRNA轉染

jetPRIME®可使多種細胞系的內源性基因表達降低90%以上。例如，jetPRIME®介導的用靶向HeLa細胞中內源性層粘連蛋白A/C的10nM siRNA雙鏈體轉染HeLa細胞，將層粘連蛋白/C基因表達顯著降低到幾乎無法檢測的水平。

圖1：使用jetPRIME®的內源性層粘連蛋白A/C沉默。用10nM的21-mer層粘連蛋白A/C siRNA轉染HeLa細胞。48小時后，使用抗層粘連蛋白A/C的抗體通過免疫熒光顯微鏡評估層粘連蛋白/C沉默。

四、不同核酸的共轉染

jetPRIME®非常適合DNA和siRNA/miRNA共轉染實驗或幾種DNA質粒的共遞送，用jetPRIME®進行了DNA和siRNA遞

送，并在各種毒性極低的細胞系中觀察到高效的基因沉默。使用10nM的siRNA，在貼壁細胞中實現了超過90%的沉默（圖2）。

圖2：使用jetPRIME®進行DNA和siRNA共轉染后，幾種細胞系中的外源性螢光素酶沉默。在6孔板中用每孔400ng p4CMV Luc和10nM熒光素酶siRNA進行實驗。

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